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645A-白膜層分離及核酸提取自動化方案-(貝克曼）
生物技術的飛速發展，也讓生物資源的利用更加精準和充分。人的血液是個巨大的寶庫，可以輔助疾病診斷與治療。隨著精準醫療的提出，個體化診斷、CART治療、單克隆抗體治療等技術不斷成熟普及，血液的利用也越來越廣泛，尤其是特定成分的使用。血液經離心分離，從上到下，可以獲得血漿、白膜層和紅細胞等。其中，白膜層的分離需要專業的技術和熟練的技巧，手工操作緩慢而繁瑣。
Beckman Biomek i5自動化工作站可以精準定位、快速分離白膜層，使流程標準化，消除不同技術人員的操作差異，提高白膜層核酸提取的產量和質量，并實現高通量樣品處理。
*掃描采血管條形碼記錄樣本信息
*拍照模塊對采血管進行拍照
*液面分析系統對紅細胞層、血漿層和白膜層進行高度分析
*分析結果上傳到Biomek軟件
*Biomek軟件根據分析系統結果進行液面高度確認
*Biomek軟件根據白膜層高度，驅動加樣器進行白膜層分離
Biomek i5自動化工作站。該款工作站配置了靈活8通道加樣器、1個斜側抓板機械手、渦旋振蕩模塊、吸頭回放模塊以及拍照模塊。拍照和采血管架模塊可根據需要進行拆卸,拆卸后可增加9個通用板位。分離96個樣本的白膜層需要約20min。
白膜層主要包括富含血小板區、富含淋巴細胞區、富含單核細胞區和富含粒細胞區,粘度較大,使用1000ul寬口吸頭可以更好地吸取白膜層。
內置轉圈吸液模板，最大限度模擬手工吸取白膜層操作,提高分離效率。
磁珠法白膜層核酸提取流程
白膜層核酸提取臺面布局舉例。96個樣本的白膜層核酸提取所需耗材:
(1)2盒100Ou吸頭,分別用于吸取試劑、白膜層和廢液。
(2)1盒20Oul吸頭,用于轉移洗脫后核酸。
(3)4個試劑槽,用于放置各種裂解液、洗滌液和洗脫液
(4)2個深孔板,分別作為提取板和廢液板。
(5)1個PCR板,用于存放提取后的核酸。
(6)1個磁力架,用于吸附磁珠。
Biomeki5 自動化工作站使用的耗材和試劑品牌開放,用戶可根據需要選擇國產或進口品牌的耗材和試劑,成本掌握在用戶手中。
靈活8通道移液器,每個通道均可獨立控制,間距可根據不同孔間距的耗材自動調整,可同時吸取不同體積的液體。
斜側抓板機械手，實現工作站內及周邊耗材的搬運，斜側夾板屬性保證耗材搬運無局限性,充分利用臺面空間。
渦旋振蕩模塊,振速0-180ORPM。模塊上帶有自動夾板器及感應裝置,樣品板在被夾板器固定后才進行高速振蕩,過程安全可靠。
拍照模塊，具備兩個高清拍照鏡頭，可以對不同高度的紅細胞層、白膜層、血漿層進行識別及定位，LED燈用于拍照過程的光補償。
獨立孔結構吸頭盒,每個吸頭都有獨立的存放空間,可自動將用過的吸頭回放至原吸頭盒的原孔中,不會發生氣溶膠交叉污染,在實驗設計允許的情況可重復使用,節約成本。
Table.1 白膜層核酸提取結果。起始樣本為8個白膜層樣本各200u利用 GenFind V2 核酸提取試劑盒通過磁珠法進行核酸提取,用Nanodrop檢測核酸濃度和純度。從上表測得的結果可以看出,Biomek工作站提取核酸的濃度、純度良好。
